材料和方法

2.1. 酒樣

分析了 20 種單品種、白葡萄酒和紅葡萄酒。 他們包括來自白葡萄品種的樣本：Tsaousi（W1、W2、W3、W4、W5）、Robola（W6、W7、W8）、Lagorthi（W9、W10）、Sideritis（W11、W12）、Tourkopoula（W13） ) 和紅色 V. vinifera 葡萄品種：Augoustiatis (R1, R2)、Refosco Rosso (R3, R4)、Mavrodafni (R5, R6)、Vertzami (R7)，栽培于希臘西部。 相應地，葡萄酒是使用相同的釀造協(xié)議生產的，白色或紅色。

2.2. 其他材料

牛血清白蛋白 (BSA) 購自 Acros Organics (NJ, USA)，L-(+)-酒石酸購自 Riedel-de Hae¨n (Seelze, Germany)，蘋果酸、乳酸和檸檬酸購自默克 (Darmstadt) ， 德國）。 KCl、NaCl、MgCl2.6H2O、CaCl2.2H2O、甘油，以及標準化合物 (+)-兒茶素、沒食子酸、乙醛、乙酸乙酯、甲醇、丙醇-1、甲基-2-丙醇-1、甲基- 2-丁醇-1、甲基-3-丁醇-1 和甲基-4-戊醇-2 來自 Sigma-Aldrich 化學公司（美國威斯康星州）。 緩沖溶液（pH 7.00 ± 0.02 和 pH 4.01 ± 0.02）來自 Mettler-Toledo。 無水乙醇、甲醇（99.8%，UV-IR-HPLC）、甲酸（98%）和鹽酸（37%）來自 Panreac Quimica SA（西班牙）、硝酸（65%）、磷酸（85%、 ACS-ISO)、硫酸 (95–97%)、氫氧化鈉、碘 (FIXANAL)、淀粉、EDTA 和磷酸二氫鉀來自 Riedel-de Haen (Seelze, Germany)。 考馬斯亮藍 G250、(-)-表兒茶素、阿魏酸、咖啡酸和對香豆酸來自 Fluka (Buchs, Switzerland)。 花青素購自 Extrasynthese (Genay, France)。 葡萄籽和皮單寧（Tanipepin 和 Taniraisin）的商業(yè)提取物來自 Martin Vialattenologie（法國埃佩奈）。 HPLC 中使用的水由 MilliQ 水系統(tǒng)獲得，最小電阻為 18.2 MV cm。

2.3. 模型解決方案

制備濃度為 8% 至 16% (v/v) 的乙醇水溶液，以匹配葡萄酒范圍。 三組含有 BSA 蛋白或商業(yè)單寧的溶液制備在：(a) 水中，(b) 12% (v/v) 乙醇溶液和 (c) 模型葡萄酒溶液。 模型葡萄酒溶液由水/乙醇混合物 (88:12%, v/v) 和 2 g/L 酒石酸組成，pH 值通過添加 2 MNaOH 調節(jié)至 3.5。 研究的濃度為 0.025、0.100、0.250、0.500、0.750 和 1.000 克 BSA/L，以及 0.1、0.5、1.0、2.0 和 4.0 克丹尼皮平或丹寧菌素/L。

2.4. 方法

2.4.1. 表面張力測定

使用 Wilhelmy Constant Run 程序，通過 Wilhelmy 板法（自動 KSV Sigma_70 張力計，赫爾辛基，芬蘭）在 25 度下進行表面張力測量。 結果表示為 mN/m，是三次重復分析的平均值。 獲得的相對標準偏差 (%) 低于 5%。

2.4.2. 分析測定

基本釀酒參數：乙醇含量（% vol.）、可滴定酸度（g 酒石酸/L）和揮發(fā)性酸度（g 乙酸/L）、pH 值和還原糖（g/L）通過傅立葉變換確定紅外光譜 (FTIR) 技術，使用 FOSS 自動分析儀（WineScanTM FT120 Basic，丹麥）。 量化基于校準曲線，該曲線使用從大量希臘品種葡萄酒分析中獲得的數據建立。 根據國際葡萄與葡萄酒組織 (1990) 快速方法測定總 SO2 (mg/L)。 所有分析均一式兩份進行。 重復性的相對標準偏差 (RSD %) 低于 10%。

總酚指數和單寧：總酚指數在 280 nm 處測定（Somers，1975；Sudraud，1958），而 Glories 方法（1978）用于測定單寧。 Shimadzu UV-1601 分光光度計（日本京都）結合 UVPC-1601 軟件用于所有 UV-vis 吸光度測量。 所有分析均一式兩份進行。 重復性的相對標準偏差 (RSD %) 低于 10%。

蛋白質：布拉德福德方法（布拉德福德，1976 年）用于測定蛋白質（Moreno-Arribas 等人，2002 年；Esteruelas 等人，2009 年）。 所有分析均一式兩份進行。 重復性的相對標準偏差 (RSD %) 低于 10%。

通過 HPLC 測定有機酸、陽離子和甘油：使用 Waters HPLC 機器，該機器由 Waters 510 泵和帶有 20 mL 定量環(huán)的 Rheodyne 7725i 型進樣閥組成。 在分析之前，將樣品通過 0.45 Millipore 過濾器過濾并通過 Sep-Pak C18 小柱（Waters，美國）進行純化。

酒石酸、蘋果酸、乳酸和檸檬酸的分離在 250 mm ? 4.6 毫米內徑，5 毫米； PrevailTM Organic Acid column (Alltech Associates, Inc., Deerfield, USA) 根據 OIV (1990)。 對于檢測，使用設置為 210 nm 的 Waters 996 光電二極管陣列檢測器。 洗脫系統(tǒng)由 25 mM KH2PO4 溶液（pH 2.5）組成； 流速為 1.5 mL/min，進樣量為 20 mL。 四種有機酸的七點校準曲線用于定量。

鉀、鈉、鎂和鈣的分離在 150 mm ? 3.9 毫米內徑，5 毫米； IC-Pak Cation M/D 柱（Waters，美國），根據 Theodoridis (1997) 的方法在等度條件下進行。 檢測使用 Waters 431 電導檢測器。 洗脫系統(tǒng)由 0.1 mM EDTA 和 3 mM HNO3 溶液組成。 流速為 1 mL/min，進樣體積為 20 mL。 四種陽離子的七點校準曲線用于定量。

甘油的分離在 150 mm * 7.8 mm id, 7 mm 上進行； 根據 Zoecklein 等人所述的方法，IC-PakTM 離子排阻柱（Waters，美國）在 60 ℃下恒溫。 (1995)。 對于檢測，使用 Waters 410 示差折光檢測器。 洗脫系統(tǒng)由等度條件下的 0.005 M H2SO4 溶液組成。 流速為 0.5 mL/min，進樣體積為 20 mL。 使用甘油標準溶液的七點校準曲線進行定量。

所有分析均一式兩份進行。 通過分析通常在葡萄酒中發(fā)現的兩種不同濃度的五種加標模型葡萄酒溶液來評估方法的重復性。 所有化合物的相對標準偏差 (RSD %) 均低于 10%。

酚類化合物的 HPLC：根據 Van De Casteele 等人的方法，使用帶有 PDA 檢測器的 HPLC 測定單個酚類化合物（兒茶素、表兒茶素、沒食子酸、咖啡酸、對香豆酸、阿魏酸和花青素）的濃度. (1983)。 為了量化，酚類化合物的標準溶液以通常在葡萄酒中發(fā)現的濃度范圍內的濃度使用。 結果表示為mg咖啡酸當量/L。 所有分析均一式兩份進行。 所有化合物的重復性相對標準偏差 (RSD %) 均低于 8%。

GC-FID 檢測揮發(fā)性化合物：將含有 50 mL 4-甲基-2-戊醇 (10 g/L) 水醇溶液作為內標的葡萄酒樣品 (5 mL) 直接注射到 Carlo Erba（GC 8000 系列）上配備火焰離子化檢測器 (EL 980) 和 50 m * 0.32 mm 內徑、0.20 mm CPCarbowax 400 (Varian Inc., USA) 毛細管柱的氣相色譜儀。 烘箱溫度保持在50℃下10分鐘，編程到80℃下5℃/min，然后在80℃下保持10分鐘。 進樣器和檢測器溫度分別為 200 和 230 ℃。 進樣 (1 mL) 以分流模式 (150 mL/min) 完成。 氦氣是載氣 (2 mL/min, 90 kPa)。 揮發(fā)性化合物（乙醛、甲醇、乙酸乙酯、1-丙醇、2-甲基-1-丙醇、2-甲基-1-丁醇和3-甲基-1-丁醇）通過比較保留時間與參考化合物。 為了量化，揮發(fā)物的標準溶液以通常在葡萄酒中發(fā)現的濃度范圍內的濃度使用（Bertrand，1968 年；Gkoulioti，2000 年）。 所有分析均一式兩份進行。 通過分析通常在葡萄酒中發(fā)現的兩種不同濃度的五種加標模型葡萄酒溶液來評估該方法的重復性。 獲得的相對標準偏差 (RSD %) 在 3.5% 和 8.2% 之間變化。

2.4.3. 統(tǒng)計分析

相關分析被用于檢驗葡萄酒的表面張力和化學成分之間的線性關系。 為了獲得預測方程，使用了單一和多元回歸分析。 使用SPSS軟件，版本14.0進行計算。

葡萄酒的表面張力與酒本身的成分之間的相關性論文——摘要、簡介

葡萄酒的表面張力與酒本身的成分之間的相關性論文——材料和方法

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葡萄酒的表面張力與酒本身的成分之間的相關性論文——結論、致謝！